Η Σπυριδούλα Πάσσαρη-Ρούστα γεννήθηκε στη Ρόδο και είναι κόρη του Χρήστου και της Μαρίας Πάσσαρη. Είναι παντρεμένη με τον Αθανάσιο Ρούστα και έχουν αποκτήσει δύο παιδιά. Είναι πτυχιούχος της Νομικής Σχολής του Δημοκρίτειου Πανεπιστημίου Θράκης (Κομοτηνή) και μέλος του Δικηγορικού Συλλόγου Ρόδου. Ασκεί μαχόμενη δικηγορία και διετέλεσε Δημοτική Σύμβουλος στο Δήμο Πεταλούδων Ρόδου (1999-2002). Συμμετέχει ενεργά σε κοινωνικές και πολιτιστικές δράσεις.
